Soluzioni e polveri per il laboratorio
Soluzioni e polveri di laboratorio sono i reagenti di supporto che circondano il saggio: tamponi di diluizione e lavaggio, stabilizzanti per anticorpi e coniugati, agenti bloccanti, albumina sierica bovina e polveri da pesare per preparare formulazioni interne. Non producono il segnale, ma decidono quanta parte del segnale è rumore. Nel catalogo CABRU la categoria riunisce le 63 referenze di Candor Medix Biochemica, l'albumina di Solabia e le formulazioni di G Biosciences, che comprendono 206 referenze di tamponi e 166 di soluzioni pronte.
Bloccare, stabilizzare, diluire: tre funzioni distinte
Il bloccante occupa i siti liberi della superficie solida perché l'anticorpo non vi si attacchi: agisce prima dell'incubazione ed è il rimedio al fondo diffuso. Lo stabilizzante lavora invece sulla proteina, mantenendo attivi anticorpo e coniugato durante la conservazione e in soluzione diluita, dove una proteina a bassa concentrazione tende ad adsorbirsi sulle pareti e a denaturare. Il diluente sta nel mezzo: porta l'anticorpo alla concentrazione di lavoro e allo stesso tempo ne sopprime i legami aspecifici. Nella gamma Candor 39 referenze sono dichiarate compatibili con l'insieme delle metodiche immunologiche — western blot, ELISA, IHC, IP, immunofluorescenza e array — con formati di lavoro da 50, 125 e 500 ml.
Le scelte che si sbagliano più spesso
| Scelta | Opzioni | Criterio |
|---|---|---|
| Agente bloccante | BSA, latte scremato, bloccanti privi di proteine | Il latte non va con gli anti-fosfo; il bloccante privo di proteine serve quando l'anticorpo riconosce BSA o quando si lavora in biotina-streptavidina |
| Grado di BSA | Frazione V, protease free, IgG free, fatty-acid free | Si sceglie in base a che cosa deve mancare: proteasi, immunoglobuline residue, acidi grassi legati |
| Conservante | Azide di sodio, alternative, nessuno | L'azide inibisce la perossidasi: non va nei diluenti dei coniugati HRP |
| Forma di fornitura | Soluzione pronta, polvere da pesare | La polvere lascia libertà su concentrazione e pH; la soluzione elimina l'errore di pesata ed è riferibile a un lotto |
Formati e conservazione
L'albumina Solabia è offerta in tre tagli — 100 g, 500 g e 1 kg — nella qualità frazione V protease free. Le polveri proteiche sono igroscopiche: vanno tenute chiuse, in ambiente asciutto, e riportate a temperatura ambiente prima di aprirle, per evitare la condensa che ne compromette la pesata e la solubilità. I tamponi privi di conservante si preparano al momento o si conservano refrigerati per il tempo indicato in scheda; quelli con conservante vanno verificati rispetto alla chimica di rivelazione prima dell'uso. La lista completa, con codici e formati, è nel catalogo prodotti; per una referenza non presente CABRU verifica la disponibilità presso i produttori rappresentati.